1.贫血表现
维生素B12缺乏者起病多隐匿，表现有乏力、头晕、活动后气短、心悸、面色苍白，严重贫血者可有轻度黄疸，可同时有白细胞计数和血小板少，患者偶有感染及出血倾向。
2.胃肠道症状
如食欲减退、腹胀、腹泻及舌炎等，以舌炎最为突出，舌质红、舌乳头萎缩、表面光滑，俗称“牛肉舌”,伴疼痛。
3.神经系统症状
维生素B12缺乏者常伴有神经系统表现，尤其是恶性贫血的患者。主要是由于脊髓后、侧索和周围神经受损所致。表现为乏力、手足对称性麻木、感觉障碍、下肢步态不稳、行走困难。小儿及老年人常表现脑神经受损的精神异常、无欲、抑郁、嗜睡或精神错乱。部分患者的神经系统症状可发生于贫血之前。
上述三组症状在恶性贫血患者中可同时存在，也可单独发生。同时存在时其严重程度也可不一致。

1.血象
为大细胞正色素贫血(mcv＞100fl),中性粒细胞及血小板均可减少。血涂片中可见多数大卵圆形的红细胞和中性粒细胞分叶过多，可有5叶或6叶以上的分叶。偶可见到巨大血小板。网织红细胞计数正常或轻度增高。
2.骨髓象
骨髓增生活跃，红系细胞增生明显增多，各系细胞均呈巨幼变型，以红系细胞最为显著。红系各阶段细胞均较正常大，胞质比胞核成熟(核质发育不平衡),核染色质呈分散的颗粒状浓缩。类似的形态改变亦可见于粒细胞及巨核细胞系，以晚幼和杆状核细胞更为明显。
3.血清维生素B12水平测定
常用微生物法及放射免疫法测定，后者测定方便，为临床常用。血清维生素B12的正常范围为200~900pg/ml.血清维生素B12＜200pg/ml可诊断维生素B12缺乏。许多因素可影响血清维生素B12测定值，叶酸缺乏、妊娠、口服避孕药、多发性骨髓瘤、大剂量维生素C治疗均可引起假性血清维生素B12缺乏；血清维生素B12测定值增高尚见于骨髓增殖症、肝脏肿瘤、活动性肝病、小肠细菌过度繁殖。因此评价血清维生素B12临床意义时应同时测定血清叶酸值。
4.血清高半胱氨酸和甲基丙二酸水平测定
用以诊断及鉴别叶酸缺乏或维生素B12缺乏。血清半胱氨酸(正常值为5~16μmol/l)水平在叶酸缺乏及维生素B12缺乏时均升高，可达50~70μmol/l.而血清甲基丙二酸水平升高(正常值为70~270nmol/l)仅见于维生素B12缺乏时，可达3500nmol/l.
5.内因子抗体测定
在恶性贫血患者的血清中，内因子阻断抗体(i型抗体)的检出率在50%以上，故内因子阻断抗体测定为恶性贫血的筛选方法之一。若阳性，应做维生素B12吸收试验。
6.维生素B12吸收试验(schillingtest)
主要用于判断维生素B12缺乏的病因。方法是：给患者肌肉注射维生素B121000μg,同时或1小时后口服57co标记的维生素B120.5μci.收集24小时尿，测定尿中57co维生素B12的含量。正常人应＞8%,巨幼细胞贫血患者及维生素B12吸收不良者＜7%.恶性贫血患者＜5%.如在5天后重复此项试验，同时口服内因子60mg,尿中57co维生素B12的排出量恢复正常，表示患者的维生素B12缺乏是由于内因子缺乏，否则是其他原因所致。如果给患者服用抗生素7~10天后试验得到纠正，表示维生素B12的吸收障碍是由于肠道细菌过量繁殖所致。此试验结果与尿量有关，准确收集24小时的尿量及事先了解试验者的肾功能非常重要。
7.其他
恶性贫血患者胃液中游离胃酸消失，注射组胺后亦不会出现。

与叶酸缺乏导致的巨幼细胞贫血鉴别，测定血清及红细胞叶酸水平；与其他原因导致的维生素B12缺乏鉴别，测定内因子阻断抗体及维生素B12吸收试验。

治疗需终生应用维生素B12.开始剂量宜大，每日肌注500~1000μg.等血象恢复正常后改用维持量。肌注氰钴胺，每月1次，每次1000μg;或每2~3个月肌注羟钴胺1000μg,后者比前者为优。也可用维生素B12每月肌注l000μg.有神经系统损害者则每周肌注维生素B12 1—2次。每次1000μg.由于维生素B12不能透过血-脑脊液屏障，故应用维生素B12椎管内注射，每次15~30μg,4~5日1次，6次为一疗程，直至神经系统恢复正常或病损不再发展为止。